南京疫情的传播链仍在继续延伸,疫情“多点爆发”,全国各地又恢复紧张的防控状态,全面开展核酸检测工作。在这紧张的环境下,如何避免“假阴性”乃是疫情防控的重中之重。所以,病毒采样管的选择是保障核酸检测准确性的利刃。
永利澳门6774cm注意到,大部分厂家的病毒采样管并没有添加洗脱珠。众所周知,样本采集后的采样管,需涡旋振荡使样本充分从拭子中释放至采样液。永利澳门6774cm认为,仅靠振荡并不能有效提升样本释放率,所以坚持在采样液中添加特殊处理的洗脱珠,振荡产生的涡旋驱动洗脱珠撞击采样拭子,使黏附在拭子上的病毒颗粒完全释放至采样液。
那么采样液中的洗脱珠是否能够有效促进样本释放,降低“假阴性”,永利澳门6774cm用以下实验论证——
实验材料
病毒采样管:去除洗脱珠的永利澳门6774cmMT0501-7-3灭活型采样管为实验组;包含洗脱珠的永利澳门6774cmMT0501-7-3灭活型采样管为对照组。每组设置两个重复。
拭子:永利澳门6774cm7cm折断点植绒拭子。
检测病毒:高浓度PEDV病毒;低浓度PEDV病毒。
核酸提取试剂盒:永利澳门6774cm免裂解核酸提取试剂(磁珠法)。
其它材料:永利澳门6774cm病毒分离无血清培养基用于稀释病毒液;痰液混合液用于模拟黏性样本。
实验步骤
1、病毒液的准备。取病毒原液,采用永利澳门6774cm病毒分离无血清培养基进行倍比稀释后得到高浓度病毒液;再对之稀释10倍,得到低浓度的病毒液。两种浓度的病毒液均准备1mL。收集痰液1mL,与病毒液混合,混合后高浓度组病毒为3×104 copies/mL,低浓度组病毒为6×103 copies/mL。
2、采样管的准备。采样管分为有洗脱珠和无洗脱珠2种,均配套用7cm折断点拭子。
3、模拟采样过程。取病毒与痰液的混合液100uL于1.5mL离心管中,用拭子将之完全吸取,然后将拭子折断至采样管中,旋紧管盖。假设病毒在采样液中充分释放,则高浓度组病毒为1×103 copies/mL,低浓度组病毒为2×102 copies/mL。
4、核酸提取与检测。提取核酸之前,先将各组管子在涡旋振荡器上振荡1分钟。采用永利澳门6774cm免裂解核酸提取试剂(磁珠法)进行核酸的提取。提取完成后对各组进行RT-qPCR检测。
实验结果
含洗脱珠组与去洗脱珠组扩增曲线图及各组Ct值统计:
实验结论
1、去除洗脱珠后,会导致相同提取条件下核酸的得率更低。
2、在临界的病毒浓度下,采样管中无洗脱珠可能会导致检测结果呈现假阴性。
目前,疫情防控形势不容乐观,多发、散发情况接连出现,各地区都时时刻刻绷紧防控筛查这根弦。而实际病毒采样的过程中,各种不确定因素不时发生,影响核酸检测的准确性,选用一款稳定好用的病毒采样管至关重要。
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